Janus Green B, anglický název Janus Green, molekulový vzorec C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, je zelený pevný prášek při pokojové teplotě a tlaku. Zdá se, že je rozpustný ve vodě, ale mírně rozpustný v alkoholových organických rozpouštědlech. Má vysokou rozpustnost ve vodě, zvláště když je rozpuštěn v horké vodě a jeví se modře. Je také mírně rozpustný v alkoholových rozpouštědlech. Tato vlastnost mu umožňuje rychle difundovat a barvit se v biologických vzorcích. Jde o specifické živé barvicí činidlo, které lze použít pro živé barvení mitochondrií, barvení hub a prvoků, barvení řezů embryí, jakož i pro redoxní indikátory a přísady pro galvanické pokovování mědi. Má dobré aplikace v oblastech základního výzkumu, jako je biochemie a fluorescenční barviva. Jeho molekulární struktura obsahuje azobarviva, což z něj činí účinné organické barvivo. Kladný náboj v jeho molekulární struktuře ho také činí určitou aplikační hodnotou v galvanických materiálech.
|
|
|
|
Chemický vzorec |
C30H31ClN6+ |
|
Přesná hmotnost |
510 |
|
Molekulová hmotnost |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Elementární analýza |
C, 70,51; H, 6,11; N, 16,44; Cl, 6,94 |
Janus Green B, jako důležité biologické barvivo má širokou škálu aplikací v mnoha oblastech.
1. In vivo barvení mitochondrií
Nejznámější-použití je jako živé barvicí činidlo specifické pro mitochondrie. Mitochondrie jsou "energetické továrny" v buňkách, které jsou zodpovědné za produkci energetických molekul, jako je ATP, k udržení buněčných životních aktivit. Dokáže specificky obarvit mitochondrie, takže pod mikroskopem s vysokým-výkonem vypadají modro-zeleně, zatímco cytoplazma je téměř bezbarvá. Tato charakteristika barvení umožňuje výzkumníkům jasně sledovat distribuci, morfologii a množství mitochondrií v buňkách, což má velký význam pro studium funkce, metabolismu a vztahu k onemocněním mitochondrií.
2. Barvení hub a prvoků
Kromě mitochondriálního barvení se dá použít i k barvení hub a prvoků. Houby a prvoci jsou důležitými objekty biologického a lékařského výzkumu a jejich morfologie, struktura a fyziologické charakteristiky jsou klíčové pro pochopení životních procesů a mechanismů onemocnění. Jeho barvicí vlastnosti usnadňují pozorování a identifikaci těchto drobných organismů pod mikroskopem, což poskytuje silnou podporu souvisejícímu výzkumu.
3. Barvení řezů embryí
Ve vývojové biologii a embryologickém výzkumu je barvení řezů embryí důležitým prostředkem k pochopení procesu vývoje embrya a strukturálních změn. Může být použit pro barvení řezů embryí, aby pomohl výzkumníkům pozorovat a analyzovat strukturu buněčné tkáně a morfologické charakteristiky embryí v různých vývojových stádiích. To má velký význam pro pochopení regulačních mechanismů embryonálního vývoje, výskytu genetických chorob a problémů reprodukčního zdraví.
4. Redoxní indikátor
Má také funkci indikátoru oxidace-redukce. Při chemických reakcích jsou oxidační a redukční stavy látek často doprovázeny změnami barvy. V různých redoxních stavech bude vykazovat různé barvy, a proto může být použit jako indikátor pro redoxní reakce. Díky této vlastnosti má potenciální aplikační hodnotu v oblastech, jako je chemická analýza, monitorování životního prostředí a potravinářský průmysl.
Počínaje 4-amino-N, N-diethylanilinem nebo p-fenylendiaminem (obsahujícím N,N-diethylanilin) se methylenová violeť 3RAX získává cyklizací s anilinem v přítomnosti oxidantu. následněJanus Green Bse připravuje diazotací a kopulační reakcí.
Výchozí materiál: Předpokládejme, že jako hlavní výchozí materiál používáme 4-amino-N, N-diethylanilin. Případ p-fenylendiaminu (obsahujícího N,N-diethylanilin) může vyžadovat další kroky k oddělení nebo syntéze požadovaného N,N-diethylsubstituovaného p-fenylendiaminu, ale zde se zaměřujeme na případ jediného výchozího materiálu.
Cíl: Cyklizovat 4-amino-N, N-diethylanilin s anilinem nebo jinými vhodnými sloučeninami za vzniku benzoheterocyklické struktury podobné methylenové violeti 3RAX. Nejprve se 4-amino-N,N-diethylanilin převede na snadněji cyklizovatelný meziprodukt některými způsoby, jako je acylace, kondenzace atd., a poté se meziprodukt cyklizuje anilinem.
Příklad reakce (není přímá, pouze pro ilustraci):
Acylační reakce (vznik amidového meziproduktu): 4-amino-N,N-diethylanilin reaguje s acylchloridem nebo anhydridem za vzniku odpovídajícího amidu.
4-amino-N,N-diethylanilin+acylchlorid → amidový meziprodukt+HCl
Kruhová reakce (hypotéza): Amidový meziprodukt se cyklizuje anilinem za podmínek katalyzátoru a/nebo zahřívání.
Amidový meziprodukt+anilin → meziprodukt podobný methylenové violeti 3RAX
Účel: Zajistit, aby meziprodukt obsahoval aromatické primární aminy pro následné diazotační reakce.
Příklad reakce (pokud je meziproduktem již aromatický primární amin, tento krok přeskočte):
Pokud meziproduktem není aromatický primární amin, může být nutné jej převést na aromatický primární amin redukcí, hydrolýzou nebo jinými reakcemi.
Neprimární aminový meziprodukt+redukční činidlo/hydrolyzační činidlo → aromatický primární aminový meziprodukt
Cíl: Převést meziprodukty aromatických primárních aminů na diazoniové soli.
Chemická rovnice:
Aromatický primární aminový meziprodukt+kyselina dusitá+kyselina → diazoniová sůl+voda
Poznámka: Diazotační reakce se obvykle provádí při nízkých teplotách (např. pod 0 °C) a za kyselých podmínek, aby se zabránilo rozkladu diazoniových solí.
Cíl: Spojovat diazoniové soli s vhodnými fenolickými nebo aromatickými aminovými sloučeninami za vzniku Jianna Green B.
Chemická rovnice (příklad): diazoniové soli+fenolické nebo aromatické aminové sloučeniny → C30H31ClN6+vedlejší-produkty
Poznámka: Kopulační reakce se obvykle provádějí za alkalických podmínek, aby se podpořila tvorba kopulačních produktů. Výběr vhodných fenolických nebo aromatických aminových sloučenin je rozhodující pro získání cílového produktu, Jianna Green B.
Další kroky: Čištění a následné{0}}zpracování
Cíl: Izolovat a vyčistit Jianna Green B z reakční směsi.
Metoda: Může zahrnovat techniky, jako je extrakce rozpouštědlem, krystalizace, rekrystalizace, chromatografická separace (jako je sloupcová chromatografie, chromatografie na tenké vrstvě, HPLC atd.).
Upozornění: Kroky čištění a následného{0}}zpracování jsou klíčové pro získání vysoce-čistých cílových produktů. V laboratoři může být nutné tyto kroky opakovat několikrát, aby se optimalizoval výtěžek a čistota.
V biologických experimentech,Janus Green Bje široce používán jako běžně používané živé barvicí činidlo pro pozorování morfologie a distribuce mitochondrií. Jeho jedinečné barvicí vlastnosti umožňují mitochondrii jasně rozlišit pod mikroskopem, což z ní činí důležitý nástroj ve výzkumu buněčné biologie. Níže bude podrobně popsáno, jak připravit 1% kvalitní frakci roztoku barviva Jianna Green B. Tento proces zahrnuje nejen přesné vážení a rozpouštění chemických činidel, ale také pečlivé zvážení faktorů, jako je teplota a výběr rozpouštědla, aby bylo zajištěno, že konečný roztok barviva je stabilní a účinný.
|
|
|
|
|
Experimentální příprava
Materiály a činidla
Jianna Green B Powder: Zajistěte, aby zakoupený Jianna Green B byl vysoce čistý a bez nečistot, což je základem pro přípravu vysoce-kvalitních roztoků barviv.
Fyziologický solný roztok: Fyziologický solný roztok, také známý jako 0,9% roztok chloridu sodného, se často používá jako rozpouštědlo v biologických experimentech ke snížení poškození buněk v důsledku jeho osmotického tlaku, který je podobný jako u lidských buněk. V tomto experimentu byl použit fyziologický roztok jako rozpouštěcí médium pro Jianna Green B.
Odměrný válec: Používá se pro přesné měření fyziologického roztoku.
Kádinka: Používá se k rozpouštění prášku Jianna Green B.
Magnetické míchadlo (volitelné): Používá se k urychlení procesu rozpouštění a zajištění rovnoměrného rozptýlení prášku v rozpouštědle.
Teploměr: Používá se ke sledování a řízení teploty během procesu rozpouštění.
Elektronická váha: Používá se pro přesné vážení prášku Jianna Green B.
Odměrná baňka (volitelná): Pokud je požadována vyšší přesnost, lze pro stanovení objemu použít odměrnou baňku. Ale při této jednoduché metodě přípravy lze přímo použít kádinky a odměrný válec.
Láhev z hnědého skla: Slouží k uchování připraveného roztoku barviva Jianna Green B. Hnědá lahvička dokáže zabránit vlivu světla na roztok barviva a zachovat jeho stabilitu.
Bezpečnostní ochrana
Noste laboratorní pláště: Chraňte oděv před chemickou kontaminací.
Používejte rukavice: Zabraňte přímému kontaktu pokožky s chemickými činidly.
Používejte ochranné brýle: Abyste zabránili vstříknutí roztoku do očí.
Provoz v digestoři: Zajistěte cirkulaci vzduchu v laboratoři a omezte hromadění škodlivých plynů.
Kroky přípravy
Pomocí elektronické váhy přesně odvažte 0,5 g prášku Jianna Green B. Pamatujte, že váha musí být před vážením zkalibrována, aby bylo zajištěno přesné vážení.
Odvážený prášek Jianna Green B opatrně nasypte do čisté kádinky, aby prášek nelétal.
Pomocí odměrného válce přesně odměřte 50 ml fyziologického roztoku. Mějte na paměti, že při měření by měl být odměrný válec umístěn na stabilním povrchu s přímkou viditelnosti s nejnižším bodem hladiny kapaliny, aby bylo zajištěno přesné měření.
Odměřený fyziologický roztok pomalu nalijte do kádinky obsahující prášek Jianna Green B. Všimněte si, že by měl být naléván pomalu podél stěny kádinky, aby nedošlo k vystříknutí kapaliny nebo vytvoření velkého množství pěny.
Jemně roztok promíchejte skleněnou tyčinkou, aby se prášek Jianna Green B rozpustil. Pokud to podmínky dovolují, lze k míchání použít magnetické míchadlo, aby se zlepšila účinnost rozpouštění.
Během procesu míchání dávejte pozor na změnu barvy roztoku. Jak se Jianna Green B rozpouští, roztok by měl postupně získávat tmavě zelenou nebo modrou-zelenou barvu.
Vzhledem k omezené rozpustnosti Jianna Green B při pokojové teplotě, aby se zlepšila účinnost rozpouštění, může být kádinka zahřátá ve vodní lázni na 30-40 stupňů Celsia. Pamatujte, že teplota by během zahřívání neměla být příliš vysoká, aby nedošlo k poškození chemické struktury Jianna Green B nebo nadměrnému odpařování rozpouštědla.
Během procesu zahřívání pokračujte v míchání roztoku, dokud se prášek Jianna Green B zcela nerozpustí a roztok se nestane jednotným a průhledným.
Po rozpuštění zkontrolujte barvu a průhlednost roztoku. Pokud jsou v roztoku nerozpuštěné částice nebo nerovnoměrná barva, je třeba pokračovat v míchání nebo vhodném zahřívání, dokud se problém nevyřeší.
Pokud je nutné upravit koncentraci roztoku, lze množství fyziologického roztoku nebo prášku Jianna Green B vhodně zvýšit nebo snížit podle aktuální situace. Ale při této metodě přípravy jsme činidlo přesně navážili podle hmotnostního zlomku 1 %, takže obvykle nejsou potřeba žádné další úpravy.
Nalijte připravený roztok barviva Jianna Green B do hnědé skleněné lahvičky a pevně ji uzavřete, aby se zabránilo kontaminaci a těkání.
Označte lahvičku názvem, koncentrací, datem přípravy a uživatelským jménem roztoku barviva pro budoucí použití a správu.
Opatření
Přesné vážení:
Zajištění přesného měření zdravého prášku zelené B a fyziologického roztoku je klíčem k přípravě vysoce-kvalitních roztoků barviv.
01
Ovládání teploty:
Během procesu zahřívání by měla být teplota přísně kontrolována, aby se zabránilo nepříznivým účinkům na kvalitu roztoku barviva způsobeným příliš vysokými nebo nízkými teplotami.
02
Dostatečné míchání:
Míchání je klíčovým krokem k zajištění rovnoměrného rozpuštění zeleného prášku B ve fyziologickém roztoku a mělo by se v něm pokračovat, dokud se roztok nestane jednotným a průhledným.
03
Bezpečný provoz:
Během celého procesu přípravy přísně dodržujte laboratorní bezpečnostní předpisy, aby byla zajištěna osobní bezpečnost a bezpečnost experimentálního prostředí.
04
Včasné použití:
Dlouhodobé skladování připraveného roztoku barviva může stále vést ke snížení jeho barvícího účinku nebo jiným chemickým změnám. Pro zajištění nejlepšího účinku barvení se doporučuje použít co nejdříve po přípravě.
05
FAQ
1. Co je Janus Green B?
Janus Green B je uměle syntetizované základní barvivo na bázi fenazinu-, které se běžně používá při biologickém barvení (jako je živé barvení mitochondrií) a jako indikátor redukce oxidace-.
2. Jaké jsou hlavní účely?
Používá se hlavně v biologických experimentech:
- Živé barvení mitochondrií (protože vnitřní membránový systém mitochondrií je dokáže obnovit do bezbarvého stavu a odhalit jejich redoxní aktivitu).
- Detekce buněčného dýchání (jako indikátor redukce oxidace-, modrá označuje oxidovaný stav a bezbarvá označuje redukovaný stav).
- Lze jej také použít jako barvivo na hedvábí a kůži v průmyslu.
3. Jaký je princip barvení?
V mitochondriích je Janusova zeleň B redukována na bezbarvý produkt enzymy na vnitřní membráně (jako je cytochrom c oxidáza) uvnitř mitochondrií; po opuštění mitochondrií je re-oxidován kyslíkem na modrou barvu. Tato reverzibilní redoxní reakce jí umožňuje specificky indikovat mitochondriální aktivitu.
4. Na co si dát pozor při používání?
- Koncentraci barviva a čas je třeba kontrolovat (obvykle 0,01 % až 0,02 %), aby se zabránilo nadměrnému barvení, které může interferovat s buněčnou aktivitou.
- U některých typů buněk nemusí být efekt barvení uspokojivý. Podmínky je potřeba optimalizovat.
- Skladujte v tmavé a uzavřené nádobě, abyste zabránili rozkladu.
Populární Tagy: janus green b cas 2869-83-2, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, koupit, cena, hromadné, na prodej