Agarózový prášekje organická látka s chemickým vzorcem c24h38o19. Jedná se o bílé nebo žluté kuličky podobné gelovým částicím nebo prášku, což je lineární polymer a základní struktura je 1,3 vázaná - D-galaktóza a 1,4- vázaná 3,6-endoether-l-galaktóza jsou střídavě spojeny.
Agarový pektin je heterogenní směs složená z mnoha menších molekul. Agaróza se obecně zahřívá na teplotu vyšší než 90 stupňů, aby se rozpustila ve vodě, a když teplota klesne na 35-40 stupňů, vytvoří dobrý polotuhý gel, což je hlavní rys a základ jeho různých použití. Výkon agarózového gelu je obvykle vyjádřen silou gelu. Čím vyšší je pevnost, tím lepší je výkon gelu.
Agarózový prášekje odvozen z polysacharidů červených řas a jeho hlavní složkou je většinou laktóza, z níž asi 70 % tvoří agaróza a 30 % agaróza s rozvětveným řetězcem.
Agaróza má lineární strukturu s opakovanými disacharidovými jednotkami tvořenými střídavě D-galaktózou a 3,6-dehydratovanou galaktózou beta-1,4 a alfa-1,3.
Extrahujte rozvětvenou agarózu z -1 se třemi vazbami oddělujícími další řetězec. Látka extrahovaná z mořských řas horkou vodou obsahuje asi 40 % agaru.
Komerční agar (obvykle označovaný jako agar) je obvykle ve formě tenkých plátků nebo volných provazců a běžně se používá jako jedlá žvýkačka, činidlo pro balení léků nebo bakteriální kultivační médium.
Čistá agaróza se často používá jako polotuhý nosič v biochemických laboratořích, pro elektroforézu, chromatografii a další techniky, pro separaci a analýzu biomolekul nebo malých molekul.
Agarózový prášekje polysacharid extrahovaný z mořských řas a je hlavní složkou agaru. Od svého objevu je široce používán v mnoha oblastech díky svým jedinečným fyzikálním a chemickým vlastnostem, jako je schopnost vytvářet gel, tepelná stabilita, chemická stabilita a biokompatibilita. Následuje podrobné vysvětlení jeho účelu:
Aplikace v biomedicínském výzkumu
Elektroforéza na agarózovém gelu je jednou z nejčastěji používaných separačních a analytických technik v molekulární biologii. Jako médium gelové elektroforézy má agaróza výhody velké velikosti pórů, širokého rozsahu separace a jednoduchého ovládání. V procesu elektroforézy biologické makromolekuly jako DNA, RNA nebo protein migrují póry agarózového gelu působením elektrického pole. Vzhledem k rozdílům v náboji, velikosti a tvaru různých molekul je jejich migrační rychlost v gelu různá, čímž je dosaženo separace.
Elektroforéza na agarózovém gelu je široce používána při klonování genů, analýze genové exprese a detekci genových mutací. Běžně se používá jako podpora nebo matrice v buněčné kultuře. Díky své vynikající biokompatibilitě a chemické stabilitě může agaróza poskytnout buňkám stabilní růstové prostředí. Například v experimentu s tvorbou kolonií na měkkém agaru se agaróza používá k přípravě polotuhého kultivačního média pro detekci schopnosti buněk vytvářet kolonie, což má velký význam pro hodnocení stupně maligní transformace buněk.
Kromě toho může být agaróza také kombinována s jinými biomateriály pro přípravu kompozitních skafoldových materiálů pro použití v tkáňovém inženýrství a regenerativní medicíně. Agarózový gel také hraje důležitou roli v imunodifuzi a imunoelektroforéze. V těchto technologiích může agarózový gel jako médium reakce antigenu a protilátky tvořit jasné precipitační linie nebo kroužky, které lze použít k detekci a analýze přítomnosti a koncentrace antigenu nebo protilátky. Velikost pórů a nábojová vlastnost agarózového gelu může ovlivnit rychlost difúze a vazebnou účinnost antigenu a protilátky, takže experimentální podmínky lze optimalizovat úpravou koncentrace a typu agarózy.
Aplikace v experimentech molekulární biologie
Elektroforézu na agarózovém gelu lze použít nejen k separaci DNA a RNA, ale lze ji také kombinovat s dalšími technologiemi k dosažení jejich purifikace. Například v procesu extrakce DNA lze k detekci integrity a čistoty DNA použít elektroforézu na agarózovém gelu a poté lze segment cílové DNA od gelu oddělit odříznutím gelu a získáním. Tato metoda má výhody snadného ovládání a vysoké rychlosti obnovy. V experimentech s hybridizací nukleových kyselin lze agarózový gel použít jako pevnou fázi k fixaci sond DNA nebo RNA na gelu a poté hybridizovat se značenou cílovou nukleovou kyselinou.
Detekcí přítomnosti a intenzity hybridizačních signálů lze určit přítomnost a koncentraci cílových nukleových kyselin. Velikost pórů a nábojová vlastnost agarózového gelu může ovlivnit vazebnou účinnost sondy a cílové nukleové kyseliny, takže podmínky hybridizace lze optimalizovat úpravou koncentrace a typu agarózy. Polymerázová řetězová reakce (PCR) je jednou z nejčastěji používaných technik v molekulární biologii pro amplifikaci DNA. Při analýze produktů PCR je jednou z nejčastěji používaných metod elektroforéza na agarózovém gelu. Separací produktů PCR pomocí elektroforézy lze detekovat velikost a čistotu amplifikovaných fragmentů, a tím určit, zda je reakce PCR úspěšná a zda existují nespecifické problémy s amplifikací.
Aplikace v biochemické analýze
Přestože je velikost pórů agarózového gelu relativně velká, není vhodný pro separaci malomolekulárních proteinů, ale přesto může být v některých případech použit pro separaci a purifikaci proteinů. Například při preparativní gelové elektroforéze lze agarózový gel použít k separaci a čištění proteinů s vyšší molekulovou hmotností.
Kromě toho může být agaróza také kombinována s jinými materiály pro přípravu kompozitního gelu pro rozšíření jeho separačního rozsahu a zlepšení účinnosti separace. V některých experimentech stanovení enzymové aktivity lze jako nosič pro imobilizaci enzymu použít agarózový gel. Imobilizace enzymu na agarózovém gelu může zachovat aktivitu a stabilitu enzymu a usnadnit separaci a izolaci enzymu z reaktantů. Tato metoda má široké uplatnění v oblasti enzymového inženýrství.
Aplikace v mikrobiologii
Agaróza se běžně používá jako koagulant v mikrobiálních kultivačních médiích. Ve srovnání s agarem má agaróza vyšší čistotu a nižší obsah nečistot, takže je vhodnější pro mikrobiální kultivaci. Při přípravě pevného kultivačního média rozpusťte agarózu v horké vodě, poté přidejte další živiny a antibiotika a ochlaďte, abyste vytvořili pevné kultivační médium.
Tento typ kultivačního média může poskytnout stabilní růstové prostředí pro mikroorganismy, což usnadňuje jejich izolaci, čištění a identifikaci. V mikrobiologických identifikačních experimentech lze k přípravě specifických identifikačních médií použít agarózový gel. Například při identifikaci střevních bakterií lze agarózové kultivační médium obsahující specifické cukry použít k rozlišení různých typů bakterií pozorováním jejich fermentace cukrů. Kromě toho lze agarózový gel také použít k přípravě biochemických reakčních médií pro mikroorganismy k detekci jejich metabolických charakteristik a enzymových aktivit.
Proces výroby agarózy lze rozdělit do čtyř částí: předúprava, extrakce, úprava DEAE celulózy a dehydratace.
Předupravené práškové suroviny se přímo suší při 80 °C po dobu 1/2 hodiny. pásové a blokové suroviny se promyjí vodou, nakrájí na malé kousky a zapečou.
Extrakce: po několika hodinách míchání a extrakci roztokem směsného esteru octanu sodného s kyselinou octovou odstraňte vodu odsátím, promyjte, poté míchejte a extrahujte tlumivým roztokem uhličitanu sodného a hydrogenuhličitanu sodného po dobu několika hodin a poté pumpujte, filtrujte a promyjte vodou.
Agarový gel extrahovaný roztokem pufru se zahřátím s vodou rozpustí ve 4% roztoku a poté se přidá DEAE celulóza za míchání po dobu 3-4 hodin za tepelné konzervace a poté se odstředí. Filtrát se shromáždí a zfiltruje, čímž se získá bílý roztok v koloidním stavu.
Dehydratace: po zahřátí bílého filtrátu se za míchání rychle přidá 95% ethanol, dokud nedojde k žádnému zjevnému vysrážení, ochladí se na pokojovou teplotu, vylije se roztok horní vrstvy, sraženina se promyje a suší, aby se získal produkt s výtěžkem 71%.
Regenerace činidla Regenerace DEAE celulózy: po odstředění se sraženina vaří s vodou, filtruje se přes hedvábnou tkaninu 100 mesh, několikrát se opakuje, dokud není filtrát čirý, poté se promyje 0,5 mol/1 HC1, 0,5 mol/1 NaOH a vodou a suší se. Výtěžnost je 95 % Frakce o teplotě 80 °C byla shromážděna přímou destilací ethanolického vodného roztoku získaného z vodného roztoku Yichun. Poté přidejte pevný chlorid sodný do nasycení a pokračujte v destilaci . 70 % lze přidat. Poté, co se chlorid sodný v láhvi odpaří, lze ji také naplnit ventilem.
Agarózový prášekse obvykle zahřeje na teplotu vyšší než 90 °C, aby se rozpustil ve vodě. Když teplota klesne na 35-40 stupňů C, vytvoří dobrý polotuhý gel, což je také jeho hlavní vlastnost a základ pro různá použití. Výkon agarózového gelu je obvykle vyjádřen silou gelu. Čím vyšší koncentrace, tím lepší účinek gelu. Gel agarózy je způsoben existencí vodíkové vazby. Jakýkoli faktor, který může zničit vodíkovou vazbu, může vést ke zničení gelu. Agaróza je hydrofilní a téměř zcela bez nabitých skupin. Zřídka způsobuje denaturaci a adsorpci na citlivé biomolekuly. Je to ideální inertní nosič.
Při přípravě agarózy je nutné co nejvíce odstranit agarózový pektin, jinak může být velmi malé množství sulfátu a pyruvátu nahrazujícího ionizované skupiny v agaróze, což může vést k elektroosmóze (EEO) a ovlivnit pohyb částic. Obsah síranů ve vysoce kvalitní-agaróze je relativně nízký, obvykle pod 0,2 %, a její elektroosmotický účinek je relativně malý, obvykle pod 0,13. Proto je agar mnohem dražší než agar.
V roce 1937 Araki poprvé izoloval agar z agaru.
Až v roce 1961 hjertin poprvé objevil vynikající vlastnosti agarózy, která přitahovala stále větší pozornost a zahájila průmyslovou výrobu. Agaróza je široce používána v klinickém testování, biochemické analýze a separaci biomolekul.
Agarózový prášek je základním nástrojem v molekulární biologii a biotechnologii. Je široce používán v gelové elektroforéze, afinitní chromatografii, imunodifuzi, imunoelektroforéze a dalších oborech.
Jeho jedinečné vlastnosti, jako je snadné použití, multifunkčnost, nízká toxicita a nákladová-efektivita, z něj činí nepostradatelnou součást laboratorního výzkumu.
Navzdory omezením omezeného rozlišení a křehkosti, nejnovější pokroky v technologii agarových gelů, včetně gelu s vysokým{0}}rozlišením, prefabrikovaného gelu a mikrofluidních zařízení na bázi agaru, rozšířily jejich praktičnost a zlepšily jejich výkon.
S neustálým pokrokem vědeckého výzkumu bude agarózový prášek nepochybně i nadále cenným a nezbytným činidlem v sadě nástrojů molekulární biologie a biotechnologie.
FAQ
Co je agaróza a jaký je její účel?
Elektroforéza na agarózovém gelu se ukázala jako účinný a efektivní způsob separace nukleových kyselin. Vysoká pevnost gelu agarózy umožňuje manipulaci s gely s nízkým procentem pro separaci velkých fragmentů DNA.
Co je agaróza a agar?
Agaróza je polysacharid extrahovaný z mořských řas (např. červené řasy) a jeho hlavní složkou je polygalaktóza. Agar se skládá z agarózy a agarového pektinu dohromady a je purifikován, aby se získala agaróza. Agaróza je lineární polymorf, zatímco agarový pektin je heterogenní směs mnoha menších molekul.
Jaký je význam agarózy?
Agaróza je definována jako vysoko{0}}molekulární-polysacharid extrahovaný z mořských červených řas, konkrétně z agarocytů Rhodophyceae, který tvoří gely ideální pro buněčné studie a gelovou elektroforézu díky své biokompatibilitě a termo-reverzibilním gelovacím vlastnostem.
Jaký je hlavní účel agarózového prášku?
Agaróza se používá hlavně pro gelovou elektroforézu a má další aplikace, jako je gelová filtrační chromatografie a afinitní čištění. Jeho nejčastější použití je při přípravě agarózových gelů, kde velikost pórů závisí na koncentraci agarózy.
Populární Tagy: agarózový prášek cas 9012-36-6, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, koupit, cena, hromadné, na prodej