Agarózový prášekje organická látka s chemickým vzorcem c24h38o19. Jedná se o bílé nebo žluté kuličky podobné gelovým částicím nebo prášku, což je lineární polymer a základní struktura je 1,3 vázaná - D-galaktóza a 1,4- vázaná 3,6-endoether-l-galaktóza jsou střídavě spojeny.
Agarový pektin je heterogenní směs složená z mnoha menších molekul. Agaróza se obecně zahřívá na teplotu vyšší než 90 stupňů, aby se rozpustila ve vodě, a když teplota klesne na 35-40 stupňů, vytvoří dobrý polotuhý gel, což je hlavní rys a základ jeho různých použití. Výkon agarózového gelu je obvykle vyjádřen silou gelu. Čím vyšší je pevnost, tím lepší je výkon gelu.
Agarózový prášek, zkráceně Ag, je nenabitá neutrální složka agaru, překládá se také jako agaróza nebo agaróza. Chemická struktura agarózy je spojena 1,3 -D-galaktózou a 1,4-vázanou 3,6-endoether-l-galaktózou jsou střídavě spojeny.
Agaróza je odvozena z polysacharidu červených řas a její hlavní složkou je polygalaktóza, z níž asi 70 % tvoří agaróza a 30 % agaróza s rozvětveným řetězcem. Agaróza má lineární strukturu a je předávána D-galaktózou a 3,6-dehydratovanou galaktózou - 1, 4 a - 1, 3 spoje střídavě tvoří opakující se disacharidové jednotky. Agaróza s rozvětveným řetězcem byla extrahována z - 1, 3 vazby oddělují další řetězec. Materiál extrahovaný z mořských řas horkou vodou obsahuje asi 40 % agaru. Komerčně dostupný agar (běžně známý jako agar) má často tvar listu nebo volného provazce a obvykle se používá jako jedlá guma, činidlo pro balení léků nebo bakteriální kultivační médium. Čistá agaróza se často používá v biochemických laboratořích jako polotuhý nosič v elektroforéze, chromatografii a dalších technologiích pro separaci a analýzu biologických makromolekul nebo malých molekul.
Proces výroby agarózy lze rozdělit do čtyř částí: předúprava, extrakce, úprava DEAE celulózy a dehydratace
1) Předupravené práškové suroviny se přímo suší při 80 °C po dobu 1/2 hodiny. pásové a blokové suroviny se promyjí vodou, nakrájí na malé kousky a zapečou
2) Extrakce: po několika hodinách míchání a extrakci roztokem směsného esteru octanu sodného s kyselinou octovou odstraňte vodu odsátím, promyjte, poté míchejte a extrahujte tlumivým roztokem uhličitanu sodného a hydrogenuhličitanu sodného po dobu několika hodin a poté pumpujte, filtrujte a promyjte vodou
3) Agarový gel extrahovaný roztokem pufru se zahřátím s vodou rozpustí ve 4% roztoku a poté se přidá DEAE celulóza za míchání po dobu 3-4 hodin za tepelné konzervace a poté se odstředí. Filtrát se shromáždí a zfiltruje, čímž se získá bílý roztok v koloidním stavu
4) Dehydratace: po zahřátí bílého filtrátu rychle za stálého míchání přidejte 95% ethanol, dokud nedojde ke zjevnému vysrážení, ochlaďte jej na pokojovou teplotu, vylijte roztok horní vrstvy, promyjte a vysušte sraženinu, abyste získali produkt, s výtěžkem 71 %.
Regenerace činidla Regenerace DEAE celulózy: po odstředění se sraženina vaří s vodou, filtruje se přes hedvábnou tkaninu 100 mesh, několikrát se opakuje, dokud není filtrát čirý, poté se promyje 0,5 mol/1 HC1, 0,5 mol/1 NaOH a vodou a suší se. Výtěžnost je 95 % Frakce o teplotě 80 °C byla shromážděna přímou destilací ethanolického vodného roztoku získaného z vodného roztoku Yichun. Poté přidejte pevný chlorid sodný do nasycení a pokračujte v destilaci . 70 % lze přidat. Poté, co se chlorid sodný v láhvi odpaří, lze ji také naplnit ventilem.
Agarózový prášekje polysacharid extrahovaný z mořských řas a je hlavní složkou agaru. Od svého objevu je široce používán v mnoha oblastech díky svým jedinečným fyzikálním a chemickým vlastnostem, jako je schopnost vytvářet gel, tepelná stabilita, chemická stabilita a biokompatibilita. Následuje podrobné vysvětlení jeho účelu:
Elektroforéza na agarózovém gelu je jednou z nejčastěji používaných separačních a analytických technik v molekulární biologii. Jako médium gelové elektroforézy má agaróza výhody velké velikosti pórů, širokého rozsahu separace a jednoduchého ovládání. V procesu elektroforézy biologické makromolekuly jako DNA, RNA nebo protein migrují póry agarózového gelu působením elektrického pole. Vzhledem k rozdílům v náboji, velikosti a tvaru různých molekul je jejich rychlost migrace v gelu různá, čímž je dosaženo separace. Elektroforéza na agarózovém gelu je široce používána při klonování genů, analýze genové exprese a detekci genových mutací. Běžně se používá jako podpora nebo matrice v buněčné kultuře. Díky své vynikající biokompatibilitě a chemické stabilitě může agaróza poskytnout buňkám stabilní růstové prostředí. Například v experimentu s tvorbou kolonií na měkkém agaru se agaróza používá k přípravě polotuhého kultivačního média pro detekci schopnosti buněk vytvářet kolonie, což má velký význam pro hodnocení stupně maligní transformace buněk.
Kromě toho může být agaróza také kombinována s jinými biomateriály pro přípravu kompozitních skafoldových materiálů pro použití v tkáňovém inženýrství a regenerativní medicíně. Agarózový gel také hraje důležitou roli v imunodifuzi a imunoelektroforéze. V těchto technologiích může agarózový gel jako médium reakce antigenu a protilátky tvořit jasné precipitační linie nebo kroužky, které lze použít k detekci a analýze přítomnosti a koncentrace antigenu nebo protilátky. Velikost pórů a nábojová vlastnost agarózového gelu může ovlivnit rychlost difúze a vazebnou účinnost antigenu a protilátky, takže experimentální podmínky lze optimalizovat úpravou koncentrace a typu agarózy.
Aplikace v experimentech molekulární biologie
Elektroforézu na agarózovém gelu lze použít nejen k separaci DNA a RNA, ale lze ji také kombinovat s dalšími technologiemi k dosažení jejich purifikace. Například v procesu extrakce DNA lze k detekci integrity a čistoty DNA použít elektroforézu na agarózovém gelu a poté lze segment cílové DNA od gelu oddělit odříznutím gelu a získáním. Výhodou této metody je snadná obsluha a vysoká míra návratnosti. V experimentech s hybridizací nukleových kyselin lze agarózový gel použít jako pevnou fázi k fixaci sond DNA nebo RNA na gelu a poté hybridizovat se značenou cílovou nukleovou kyselinou. Detekcí přítomnosti a intenzity hybridizačních signálů lze určit přítomnost a koncentraci cílových nukleových kyselin.
Velikost pórů a nábojová vlastnost agarózového gelu může ovlivnit vazebnou účinnost sondy a cílové nukleové kyseliny, takže podmínky hybridizace lze optimalizovat úpravou koncentrace a typu agarózy. Polymerázová řetězová reakce (PCR) je jednou z nejčastěji používaných technik v molekulární biologii pro amplifikaci DNA. Při analýze produktů PCR je jednou z nejčastěji používaných metod elektroforéza na agarózovém gelu. Separací produktů PCR pomocí elektroforézy lze detekovat velikost a čistotu amplifikovaných fragmentů, a tím určit, zda je reakce PCR úspěšná a zda existují nespecifické problémy s amplifikací.
Přestože je velikost pórů agarózového gelu relativně velká, není vhodný pro separaci malomolekulárních proteinů, ale přesto může být v některých případech použit pro separaci a purifikaci proteinů. Například při preparativní gelové elektroforéze lze agarózový gel použít k separaci a čištění proteinů s vyšší molekulovou hmotností. Kromě toho může být agaróza také kombinována s jinými materiály pro přípravu kompozitního gelu pro rozšíření jeho separačního rozsahu a zlepšení účinnosti separace. V některých experimentech stanovení enzymové aktivity lze jako nosič pro imobilizaci enzymu použít agarózový gel. Imobilizace enzymu na agarózovém gelu může zachovat aktivitu a stabilitu enzymu a usnadnit separaci a izolaci enzymu z reaktantů. Tato metoda má široké uplatnění v oblasti enzymového inženýrství.
Aplikace v mikrobiologii
Agaróza se běžně používá jako koagulant v mikrobiálních kultivačních médiích. Ve srovnání s agarem má agaróza vyšší čistotu a nižší obsah nečistot, takže je vhodnější pro mikrobiální kultivaci. Při přípravě pevného kultivačního média rozpusťte agarózu v horké vodě, poté přidejte další živiny a antibiotika a ochlaďte, abyste vytvořili pevné kultivační médium. Tento typ kultivačního média může poskytnout stabilní růstové prostředí pro mikroorganismy, což usnadňuje jejich izolaci, čištění a identifikaci. V mikrobiologických identifikačních experimentech lze k přípravě specifických identifikačních médií použít agarózový gel. Například při identifikaci střevních bakterií lze agarózové kultivační médium obsahující specifické cukry použít k rozlišení různých typů bakterií pozorováním jejich fermentace cukrů. Kromě toho lze agarózový gel také použít k přípravě biochemických reakčních médií pro mikroorganismy k detekci jejich metabolických charakteristik a enzymových aktivit.
Agarózový prášekse obecně zahřeje nad 90 stupňů, aby se rozpustil ve vodě, a když teplota klesne na 35-40 stupňů, vytvoří dobrý polotuhý gel, což je hlavní rys a základ jeho různých použití. Výkon agarózového gelu je obvykle vyjádřen silou gelu. Čím vyšší je pevnost, tím lepší je výkon gelu. Gel agarózy je způsoben existencí vodíkových vazeb. Jakýkoli faktor, který může zničit vodíkové vazby, může vést ke zničení gelu. Agaróza je hydrofilní a téměř zcela bez nabitých skupin. Zřídka způsobuje denaturaci a adsorpci na citlivé biologické makromolekuly. Je to ideální inertní nosič. V procesu přípravy agarózy je nutné co nejvíce odstranit agarový pektin, jinak může být velmi malé množství sulfátu a kyseliny pyrohroznové nahrazující ionizační skupinu v agaróze, což způsobí elektroosmózu (EEO) a ovlivní pohyb částic. Obsah síranů v agaróze dobré kvality je relativně nízký, obvykle pod 0,2 %, a elektroosmóza je relativně malá, obvykle pod 0,13. To je důvod, proč je agaróza tak drahá než agar.
V roce 1937 Araki poprvé oddělil agarózu od agaru, ale teprve v roce 1961 hjertin poprvé objevil vynikající vlastnosti agarózy, která přitahovala stále více pozornosti a začala průmyslovou výrobu. Agaróza je široce používána v klinických testech, biochemické analýze a separaci biomakromolekul.
Agarózový prášek je základním nástrojem v molekulární biologii a biotechnologii se širokou škálou aplikací v gelové elektroforéze, afinitní chromatografii, imunodifuzi a imunoelektroforéze. Jeho jedinečné vlastnosti, jako je snadné použití, všestrannost, nízká toxicita a nákladová-efektivita, z něj činí nepostradatelnou součást laboratorního výzkumu. Navzdory svým omezením, jako je omezené rozlišení a křehkost, nedávný pokrok v technologii agarózových gelů, včetně gelů s vysokým -rozlišením, předem{4}}odlitých gelů a mikrofluidních zařízení na bázi agarózy{5}}, rozšířily jeho použitelnost a zlepšily jeho výkon. Jak vědecký výzkum pokračuje v pokroku, agarózový prášek nepochybně zůstane cenným a nezbytným činidlem v sadě nástrojů molekulární biologie a biotechnologie.
Populární Tagy: agarózový prášek cas 9012-36-6, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, koupit, cena, hromadné, na prodej