Thiazolylová modř CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. je jedním z nejzkušenějších výrobců a dodavatelů thiazolyl blue cas 298-93-1 v Číně. Vítejte ve velkoobchodním hromadném vysoce kvalitním thiazolylovém modrém cas 298-93-1 k prodeji zde z naší továrny. Dobré služby a rozumná cena jsou k dispozici.

Thiazolylová modř, lépe známý jako MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid), v sobě skrývá fascinující dualitu – je to jak zásadní nástroj v buněčné biologii, tak chameleonská chemická zvláštnost. Tento žlutý krystalický prášek prochází v živých buňkách překvapivou metamorfózou: mitochondriální reduktázy štěpí jeho tetrazoliový kruh a přeměňují jej na nerozpustnou fialovou formazanovou sraženinu – což je reakce tak vizuálně pozoruhodná, že se stala zlatým standardem pro měření životaschopnosti buněk. Přesto mimo laboratorní lavici MTT odhaluje více esoterického chování; jeho krystalická struktura tvoří pod mikroskopem zvláštní vzory „rybí kosti“, zatímco jeho redoxní vlastnosti mu umožňují účastnit se exotických fotochemických reakcí, když je vystaven specifickým vlnovým délkám světla. Je zvláštní, že sloučenina vykazuje vzácný jev zvaný "metachromasia" - objevující se různé barvy v závislosti na koncentraci a molekulárním prostředí - vlastnost, kterou kdysi využívali textilní chemici k vytvoření "chytrých" barviv. Nedávné studie odhalily jeho neočekávanou roli jako slabého inhibitoru určitých enzymů dýchacího řetězce, což naznačuje, že toto všudypřítomné testovací činidlo mohlo jemně ovlivňovat samotné metabolické procesy, které vědci používají ke studiu. Když jsou roztoky MTT rozpuštěny v organických rozpouštědlech, vykazují neobvyklý efekt zhášení fluorescence, který zmátl fyzikální chemiky, což naznačuje, že složité mezimolekulární interakce stále čekají na úplné vysvětlení.

Thiazolylová modř,Chemický název je 3-(4,5-dimethyl-2-thiazol)-2,5-difenyltetrazolium bromid, zkráceně MTT, což je důležitá organická sloučenina. Od roku 1983, kdy Mosman poprvé ohlásil použití MTT barvení k určení buněčného růstu a přežití, se MTT široce používá v oblastech, jako jsou vědy o živé přírodě, lékařský výzkum a vývoj léků. Následuje podrobné vysvětlení jeho účelu:

Aplikace ve výzkumu buněčné biologie

 

MTT je jednou z klasických metod stanovení buněčné proliferace. Během buněčné kultivace mohou dehydrogenázy, jako je sukcinátdehydrogenáza v mitochondriích živých buněk, redukovat exogenní MTT na nerozpustný modrofialový krystalický formazan, který se ukládá v buňce. Mrtvé buňky postrádají tuto redukční schopnost, a proto neprodukují formazan. Rozpuštěním formazanu v buňkách a měřením jeho hodnoty absorpce světla při specifických vlnových délkách (jako je 490nm nebo 562nm) pomocí čtečky enzymového -imunosorbentního testu (ELISA) lze počet živých buněk nepřímo odrazit. V určitém rozmezí počtu buněk je množství vytvořených krystalů MTT úměrné počtu buněk, takže proliferaci buněk lze určit na základě naměřené hodnoty absorbance (hodnota OD).

Aplikace ve výzkumu buněčné biologie

 

MTT lze také použít ke stanovení toxicity léků nebo jiných léčebných metod (jako je radiační ozařování) na kultivovaných buňkách in vitro. Porovnáním hodnot OD léčebné skupiny a kontrolní skupiny lze vyhodnotit účinek léků nebo léčebných metod na buněčnou aktivitu. Čím větší je hodnota OD, tím silnější je buněčná aktivita; Naopak ukazuje, že čím slabší je buněčná aktivita nebo tím větší je buněčná toxicita. Tato metoda má široké uplatnění ve screeningu drog, toxikologickém výzkumu a dalších oblastech. Ačkoli se MTT používá hlavně k měření buněčné proliferace a cytotoxicity, v některých případech může být také použit jako pomoc při studiu buněčné apoptózy. Během procesu buněčné apoptózy se enzymová aktivita uvnitř buňky mění, což může ovlivnit redukční schopnost MTT. Porovnáním rozdílu hodnot OD mezi apoptotickými buňkami a normálními buňkami lze předběžně stanovit výskyt buněčné apoptózy. Je však třeba poznamenat, že MTT není specializovanou metodou pro detekci buněčné apoptózy a její výsledky je třeba komplexně analyzovat ve spojení s jinými metodami detekce apoptózy.

Aplikace ve vývoji léků

 

V procesu vývoje léků je MTT test běžně používanou vysoce{0}}propustnou metodou screeningu léků. Společnou inkubací testovaného léčiva s buňkami a použitím MTT testu k měření změn v buněčné aktivitě lze rychle testovat potenciální aktivní molekuly léčiva. Tato metoda má výhody snadného ovládání, spolehlivých výsledků a vysoké propustnosti a má důležitou aplikační hodnotu v rané fázi vývoje léčiva. Test MTT lze také použít ke studiu mechanismu účinku léčiv. Porovnáním změn v buněčné aktivitě za různých podmínek léčby léčivem lze předběžně určit dopad léčiv na procesy, jako je buněčná proliferace a apoptóza. Kombinací dalších technik molekulární biologie, jako je Western blot a průtoková cytometrie, lze dále odhalit cíle a signální dráhy léků. Při hodnocení bezpečnosti léků lze MTT test použít k posouzení toxických účinků léků na buňky. Měřením změn hodnoty OD buněk po léčbě lékem je možné určit, zda má lék cytotoxicitu a sílu toxicity. To má velký význam pro vedení preklinického výzkumu a klinické aplikace léčiv.

Aplikace MTT v jiných oborech

 

V imunologickém výzkumu lze MTT test použít ke stanovení proliferační schopnosti lymfocytů. Společnou inkubací lymfocytů s antigeny nebo imunostimulanty a měřením změn v buněčné aktivitě pomocí MTT testu lze hodnotit schopnost imunitní odpovědi lymfocytů. Tato metoda má široké uplatnění ve vývoji vakcín, imunoterapii a dalších oblastech. V onkologickém výzkumu lze MTT test použít ke stanovení proliferační aktivity a lékové citlivosti nádorových buněk. Porovnáním změn hodnot OD nádorových buněk za různých podmínek léčby léky lze testovat molekuly léku s inhibičními účinky na nádorové buňky a hodnotit jejich proti-nádorové účinky. To má velký význam pro vedení klinické léčby nádorů. V environmentálním toxikologickém výzkumu lze MTT test použít k hodnocení toxických účinků environmentálních polutantů na buňky. Společnou inkubací buněk s různými koncentracemi znečišťujících látek a měřením změn buněčné aktivity pomocí MTT testu lze určit toxicitu a mechanismus účinku znečišťujících látek. To má velký význam pro hodnocení ekologických rizik látek znečišťujících životní prostředí a formulování politik ochrany životního prostředí. 

Experimentální krokythiazolylová modřmetoda:

1: Trypsin štěpí buňky logaritmické fáze, centrifuguje je a po ukončení je shromažďuje, aby se vytvořila buněčná suspenze, a upravuje svou koncentraci na 5-10 počtem buněk × 104/ml. Pro začátečníky je nutné, aby buňky dosáhly 5-10 × 104/ml, často neví, kde začít. Jsem tu, abych vám poskytl jednoduchou metodu, jak zpočátku určit počet buněk.

Vezměte si jako příklad 25 cm2 běžně používaných pro buněčnou kulturu:

1) Hustota buněk je asi 80%~90% (obrázek níže ukazuje přibližný stav buněk při hustotě 80%~90%). Po digesci a odstředění odstraňte supernatant a přidejte 3 ml média, aby se to promíchalo.

2) Vezměte novou 15ml sterilní centrifugační zkumavku (pro další krok inokulace 96jamkové destičky) a naplňte ji asi 9ml média

3) Odeberte 1 ml z 3ml buněčné suspenze připravené v prvním kroku, přidejte ji do horní zkumavky a po promíchání spočítejte buňky. V tomto okamžiku je to obecně 5-10 nebo méně × 104/ml, což odpovídá 5-10 buňkám na buňku ve 4 buňkách desky pro počítání buněk (viz obrázek níže); Pokud koncentrace nestačí, přidá se buněčná suspenze podle výsledku počítání a každá kapka se vypočítá jako 50 ul.

4) Počet buněk by měl být upraven podle různých účelů experimentu. Například v obecném experimentu buněčné proliferace lze použít 2000 buněk na jamku (ekvivalent hustoty buněčné suspenze 2 x 104/ml), 5000 až 10000 buněk na jamku (ekvivalent hustoty buněčné suspenze 5 x 104/ml). Kromě toho by měl být počet buněk také určen podle jejich vlastních charakteristik, jako je rychlost růstu. Například hustota rychleji rostoucích buněk může být o něco menší.

2. Po přípravě buněčné suspenze ji jemně promíchejte a přidejte 100 ul do každého otvoru tak, aby hustota testovaných buněk byla 5000-10000/otvor (okrajový otvor je naplněn sterilním PBS).

L Poznámka: Vzhledem k tomu, že se buňky po smíchání budou dále usazovat, je nutné během procesu očkování opakovaně promíchat, jako je promíchání jednou za šest otvorů, aby se zajistilo, že hustota buněk očkování bude mezi otvory přesně stejná, což je pro výsledky MTT rozhodující.

3. Vložte naočkovanou destičku pro kultivaci buněk do inkubátoru pro kultivaci, dokud buněčná monovrstva nebude pokryta dnem otvoru (plochá destička s 96 otvory), a přidejte lék s koncentračním gradientem. V zásadě lze lék přidat po přichycení buňky ke stěně, nebo dvě hodiny nebo půl dne, ale často přidáváme lék odpoledne předchozího dne a druhý den ráno. Obecně je nastaveno 5-7 gradientů, 100 ul na díru a 3-5 vícenásobných děr. Doporučuje se nastavit 6, jinak je obtížné odrážet skutečný stav. Následující obrázek lze použít jako referenční krok pro desku s 96 otvory.

L Pro dávkování někteří lidé přímo přidávají léky do 96jamkových destiček v různých objemech, aby se vytvořil koncentrační gradient. Myslím si ale, že bychom měli zkusit smíchat různé koncentrace léků v EP zkumavce, poté odebrat kultivační supernatant z 96jamkové destičky (který lze odsát vypouštěcí pistolí) a přidat 100 ul kultivačního média obsahujícího různé koncentrace léků, což může zajistit přesnost koncentrace léku. Kromě toho je třeba poznamenat, že pokud se použije tato metoda, neodsávejte veškerý roztok kultury na 96jamkové destičce před přidáním léku. Vzorky byste měli přidat ihned po nasátí jejich části, abyste zabránili buněčné smrti v důsledku vysychání 96jamkové destičky.

Inkubujte s 4,5% CO2 při 37 stupních po dobu 16-48 hodin a pozorujte účinek léku pod inverzním mikroskopem. Následující obrázek ukazuje typický gradient cytotoxicity léčiva.

4. Přidejte 10 ul roztoku MTT (5 mg/ml, tj. . 0.5 % MTT) do každé jamky a pokračujte v kultivaci po dobu 4 hodin. Pokud může lék reagovat sthiazolylová modřkultivační roztok může být po centrifugaci zlikvidován a kultivační roztok obsahující MTT může být přidán poté, co byl 2-3krát promyt PBS.

5. Zastavte kulturu a připravte na rozpuštění a krystalizaci.

Thiazolylová modř, jehož čínský název je Methyl Blue, je důležitou organickou sloučeninou, která je široce používána v medicíně, biologii a chemii. v lékařství se často používá k léčbě otravy dusitany, otravy kyanidem atd. a používá se také při diagnostice a adjuvantní léčbě některých nemocí; V biologickém výzkumu se může použít jako barvicí činidlo pro značení buněk nebo tkání. Nicméně, jako mnoho léků, methylenová modř může mít také řadu vedlejších účinků během užívání:

Nežádoucí účinky na trávicí systém

Nevolnost a zvracení jsou jedním z běžných vedlejších účinků methylenové modři na trávicí systém. Když methylenová modř vstoupí do těla, může stimulovat gastrointestinální sliznici, což může způsobit nevolnost a v těžkých případech dokonce zvracení. Tento příznak je výraznější, když je rychlost intravenózní injekce příliš vysoká nebo dávka je příliš velká. Například v některých klinických případech mohou pacienti pociťovat závažnou nevolnost a zvracení krátce po rychlé intravenózní injekci methylenové modři, což ovlivňuje jejich pohodlí a zážitek z léčby. Někteří pacienti mohou po použití methylenové modři pociťovat bolest břicha a míra bolesti se může lišit v závislosti na individuálních rozdílech, od mírného nepohodlí až po silnější bolest.

Zároveň může být provázen i průjmem, který může být důsledkem interference methylenové modři na střevní peristaltiku a trávicí funkci, vedoucí k abnormálnímu pohybu střev a změnám v sekreci trávicí tekutiny. Dlouhodobý nebo častý výskyt bolestí břicha a průjmu neovlivňuje pouze vstřebávání živin a fyzické zdraví pacienta, ale může vést i k dalším komplikacím.

Nežádoucí účinky na močový systém

Po užití methylenové modři se barva moči změní na modrou, což je způsobeno vylučováním methylenové modři a jejích metabolitů do moči ledvinami. Obecně je tato změna barvy moči dočasná a nebude mít vážný dopad na fyzické zdraví. Ale v některých zvláštních případech, jako jsou pacienti s onemocněním močového systému, mohou změny barvy moči interferovat s diagnózou onemocnění a lékaři musí provést komplexní analýzu na základě dalších vyšetřovacích ukazatelů. Během močení mohou někteří pacienti pociťovat štípání v ústí močové trubice.

 

To může být způsobeno stimulačním účinkem methylenové modři na sliznici močové trubice, zvláště při vysoké koncentraci moči nebo při tření sliznice močové trubice při močení bude pocit píchání výraznější. Tento příznak může pacientům způsobit určité nepohodlí a ovlivnit jejich každodenní život.

Neurologické vedlejší účinky

Závratě a bolest hlavy jsou běžné neurologické vedlejší účinky methylenové modři. Po použití methylenové modři mohou pacienti pociťovat závratě a dezorientaci v hlavě nebo pociťovat nepříjemné pocity, jako je otok a bolest hlavy. Tento příznak může ovlivnit pacientovu pozornost a schopnost myšlení a snížit efektivitu práce a života. Výskyt závratí a bolestí hlavy může souviset s účinky methylenové modři na mozkové cévy a nervy a konkrétní mechanismus ještě potřebuje další výzkum. Ve vzácných případech může methylenová modř způsobit poruchy vědomí, jako je ospalost, kóma atd.

To je obvykle způsobeno nadměrným užíváním methylenové modři nebo přecitlivělostí pacientů na lék, což způsobuje závažnou inhibici centrálního nervového systému. Poruchy vědomí jsou závažným vedlejším účinkem, který může ohrozit bezpečnost života pacienta a vyžaduje okamžitou záchrannou léčbu.

1.Jaké je použití thiazolylové modři tetrazoliumbromidu?

Thiazolylová modř Tetrazoliová modř (MTT) může být použita při měření buněčné proliferace. MTT vytváří nažloutlý roztok, který je mitochondriálními dehydrogenázami živých buněk přeměněn na tmavě modrý, ve vodě -nerozpustný MTT formazan.

2. Je thiazolyl Blue bezpečné skladovat?

Teplotní podmínky: Uzavřete prášek a uložte jej v chladničce při -20 stupních pro konzervaci mrazem, což může účinně prodloužit životnost (obvykle 1–2 roky); pro krátkodobé skladování (do 1 měsíce) může být dočasně skladován při 4stupňovém chlazení.

Požadavky na odolnost proti světlu-a vlhkosti-: Prášek MTT je citlivý na světlo-a měl by být skladován v hnědých lahvičkách na činidla nebo průhledných lahvičkách zabalených do alobalu. Mezitím by měla být přidána sušicí činidla (např. silikagel), aby se zabránilo tomu, že prášek absorbuje vlhkost a spéká.

3. Změní se barva thiazolylové modři?

Pokud roztok vykazuje modrofialovou sraženinu nebo ztmavne, znamená to, že byl oxidován a nelze jej dále používat.
Vyhněte se umístění roztoku při pokojové teplotě nebo ve světlém prostředí, protože může rychle selhat.

Populární Tagy: thiazolyl blue cas 298-93-1, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, koupit, cena, hromadné, na prodej