Moderátor, CAS 367-93-1, chemická struktura složená z isopropylu – Skládá se z D-thiogalaktosidových a fosfátových skupin. Mezi nimi - D-thiogalaktosid je analog galaktózy, ve které atom síry nahrazuje atom kyslíku. Tato speciální glykosidová struktura umožňuje IPTG vázat se na DNA a indukovat genovou expresi. IPTG má nízkou rozpustnost ve vodě, ale může se dobře rozpouštět ve fyziologickém roztoku a fosfátovém pufru. Je kyselý s hodnotou pKa 4,5, což souvisí s fosfátovou skupinou v jeho molekulární struktuře. Není snadné krystalizovat v čisté vodě, ale může tvořit krystaly v roztocích s vysokou koncentrací nebo po přidání jiných sloučenin. Vzhledem ke své schopnosti indukovat expresi bakteriálních proteinů je IPTG citlivý na určité mikroorganismy. Například některé bakterie mohou přestat růst nebo zemřít po vystavení IPTG.
(Odkaz na produkt 1: https://www.bloomtechz.com/syntetické-chemické/api-výzkumné-pouze/iptg-činidlo-cas-367-93-1.html ）
(Odkaz na produkt 1: https://www.bloomtechz.com/syntetické-chemické/api-výzkumné-pouze/iptg-prášek-cas-367-93-1.html ）
Enzymatická syntéza IPTG je metoda, která využívá enzymy ke katalýze reakce galaktózy a uridintrifosfátu za vzniku isopropylových skupin- - Metoda pro D-thiogalaktosid. Níže jsou uvedeny podrobné kroky a chemické rovnice této metody:
1. Přípravné práce:
Připravte si nezbytná činidla a vybavení, včetně galaktózy, uridintrifosfátu, enzymů, pufru, reakčních nádob, regulátorů teploty atd.
Přidejte galaktózu a uridintrifosfát v určitém poměru do reakční nádoby.
Přidejte vhodné množství enzymu a pufru pro udržení stability pH reakčního systému.
Umístěte reakční nádobu do regulátoru teploty a nastavte vhodnou reakční teplotu.
2. Proces reakce
2.1 Reakční systém rovnoměrně promíchejte při vhodné teplotě.
2.2 Udržujte teplotu a stabilitu pH reakčního systému a pokračujte v míchání.
2.3 Odběr vzorků a testování isopropylu v pravidelných intervalech- - Výroba D-thiogalaktosidu.
2.4 Upravte dávkování enzymu a reakční dobu na základě výsledků testu, abyste získali nejlepší produkci D-thiogalaktosidu isopropylskupiny- -.
3. Chemická rovnice
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Mezi nimi ATP představuje adenosintrifosfát, UDP představuje uridindifosfát a Pi představuje anorganický fosfor. Tato chemická rovnice představuje tvorbu isopropylových skupin z galaktózy a uridintrifosfátu působením enzymů- - D-thiogalaktosidu a ADP a také Pi.
4. Separace a čištění
Po dokončení reakce se reakční roztok zfiltruje nebo odstředí, aby se odstranila nezreagovaná galaktóza, uridintrifosfát a další nečistoty.
Použití vhodných separačních a purifikačních technik, jako je iontová výměna, chromatografie atd., k dalšímu čištění isopropyl- -D-thiogalaktosidu.
Proveďte testování kvality, jako je vysokoúčinná kapalinová chromatografie, hmotnostní spektrometrie atd., abyste zajistili, že kvalita produktu odpovídá požadavkům.
5. Shrnutí
Metoda enzymatické syntézy IPTG má vysokou selektivitu, výtěžek a čistotu, stejně jako šetrnost k životnímu prostředí a vysokou bezpečnost. Při této metodě má typ, koncentrace, hodnota pH, teplota a další podmínky enzymu významný vliv na výsledky reakce a je vyžadována přesná kontrola a nastavení. Kromě toho jsou separační a purifikační kroky také zásadní pro zajištění kvality a čistoty produktu. V praktickém provozu by měly být úpravy a optimalizace prováděny podle konkrétních okolností, aby se dosáhlo nejlepší isopropylové skupiny- - Výroba a kvalita D-thiogalaktosidu.
Vícesložková reakční metoda IPTG je reakce, která využívá účast více složek k syntéze isopropyl- - Metoda pro D-thiogalaktosid. Níže jsou uvedeny podrobné kroky a chemické rovnice této metody:
1. Přípravné práce
Připravte si potřebná činidla a vybavení, včetně galaktózy, uridintrifosfátu, adenosintrifosfátu, thiosíranu sodného, enzymů, pufru, reakčních nádob, regulátorů teploty atd.
Přidejte galaktózu, uridintrifosfát, adenosintrifosfát a thiosíran sodný v určitém poměru do reakční nádoby.
Přidejte vhodné množství enzymu a pufru pro udržení stability pH reakčního systému.
Umístěte reakční nádobu do regulátoru teploty a nastavte vhodnou reakční teplotu.
2. Proces reakce
2.1 Reakční systém rovnoměrně promíchejte při vhodné teplotě.
2.2 Udržujte teplotu a stabilitu pH reakčního systému a pokračujte v míchání.
Během reakčního procesu je třeba věnovat pozornost sledování průběhu reakce, včasné úpravě množství enzymu a reakční doby, aby se dosáhlo co nejlepší produkce D-thiogalaktosidu isopropylové skupiny- -.
3. Chemická rovnice
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Mezi nimi ATP představuje adenosintrifosfát, UDP představuje uridindifosfát, ADP představuje adenosindifosfát a Pi představuje anorganický fosfor. Tato chemická rovnice představuje tvorbu isopropylových skupin z galaktózy, uridintrifosfátu a adenosintrifosfátu působením enzymů - - D-thiogalaktosidu a Pi.
4. Separace a čištění
Po dokončení reakce se reakční roztok zfiltruje nebo odstředí, aby se odstranila nezreagovaná galaktóza, uridintrifosfát, adenosintrifosfát a další nečistoty.
Použití vhodných separačních a purifikačních technik, jako je iontová výměna, chromatografie atd., k dalšímu čištění isopropyl- -D-thiogalaktosidu.
Proveďte testování kvality, jako je vysokoúčinná kapalinová chromatografie, hmotnostní spektrometrie atd., abyste zajistili, že kvalita produktu odpovídá požadavkům.
5. Shrnutí
Vícesložková reakční metoda IPTG využívá výhod více složek účastnících se reakce společně s vysokou selektivitou, výtěžkem a čistotou. Při této metodě se kromě hlavních surovin, jako je galaktóza, uridintrifosfát a enzymy, přidávají také pomocné složky, jako je adenosintrifosfát a thiosíran sodný, aby se podpořila reakce a zlepšila kvalita produktu. Kromě toho jsou separační a purifikační kroky také zásadní pro zajištění kvality a čistoty produktu. V praktickém provozu by měly být úpravy a optimalizace prováděny podle konkrétních okolností, aby se dosáhlo nejlepší isopropylové skupiny- - Výroba a kvalita D-thiogalaktosidu. Současně je třeba věnovat pozornost kontrole reakčních podmínek, jako je teplota, hodnota pH a dávkování enzymu, aby se dosáhlo nejlepšího reakčního účinku.