Dihydroethididium, CAS číslo 104821-25-2, molekulární vzorec C21H21N3, s přesnou molekulovou hmotností 315,41, je důležitou sloučeninou s rozsáhlými biologickými aplikacemi. Obvykle se jeví jako jemný krystalický prášek od růžové po fialovou. Tato jedinečná barva usnadňuje rozpoznávání v laboratoři a poskytuje přírodní zářivku pro její použití jako fluorescenční sondu. V chemickém a biologickém výzkumu se často používá jako sonda k detekci reaktivních druhů kyslíku, zejména při detekci intracelulárních superoxidových aniontů, což vykazuje extrémně vysokou účinnost. Toto barvivo může volně vstoupit do buněk a dehydrogenátu za vzniku ethidiumbromidu. Tato sonda byla široce používána v NK buňkách a jako důležité barvivo pro identifikaci buněčné proliferace a hypoxie v nádorech.
|
|
|
|
Chemický vzorec |
C56H92O29 |
|
Přesná hmota |
1229 |
|
Molekulová hmotnost |
1229 |
|
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
|
Elementární analýza |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
Dihydroethididium, jako modrá fluorescenční sonda, která může proniknout do buněk, hraje důležitou roli v oblasti biologie a medicíny. Její jedinečné vlastnosti fluorescence mu umožňují detekovat hladiny superoxidových aniontů (o 2-) v buňkách, čímž odhalují mechanismy reaktivních druhů kyslíku v buněčné fyziologii a patologii.
1. Zobrazování buněk
Dihydroethylen, jako fluorescenční sonda, může vstoupit do buněk a vázat se na DNA a emitovat červenou fluorescenci. Proto se v technologii zobrazování buněk široce používá ke sledování stavu redoxu v buňkách v reálném čase. Prostřednictvím zařízení, jako je fluorescenční mikroskopie nebo průtoková cytometrie, mohou vědci pozorovat distribuci a změny dihydroethylenediaminu v buňkách, čímž pochopí redoxní stav buněk ve fyziologických nebo patologických stavech.
2. detekce redoxního stavu
Fluorescenční vlastnosti ethylenového dihydrogenu z něj činí ideální nástroj pro detekci redoxního stavu. V buňkách může být dihydroethylendiamin oxidován superoxidovými anionty za vzniku ethylendiaminu, který se pak váže na DNA a emituje červenou fluorescenci. Proto detekcí intenzity fluorescence dihydroethyleniaminu může být hladina intracelulárních superoxidových aniontů nepřímo odrážena, čímž se vyhodnotí redoxní stav buněk. Tato metoda detekce má výhody vysoké citlivosti, specificity a vysoce výkonné, poskytuje výkonný nástroj pro studium dynamických změn buněčného redoxního stavu.
3. výzkum nádoru
Dihydroethylen má ve výzkumu nádoru širokou škálu aplikací. V důsledku vysokých redoxních hladin nádorových buněk může dihydroethylenemianem sloužit jako účinný nádorový marker pro včasnou diagnózu a terapeutické hodnocení nádorů. Kromě toho lze dihydroethylendiamin také použít ke studiu biologických procesů proliferace nádorových buněk, apoptózy a invaze, což poskytuje důležitá stopy pro odhalení mechanismů výskytu a vývoje nádoru.
4. Screening léčiva
Dihydroethylendiamin hraje také důležitou roli při screeningu léků. Mnoho léků, i když vyvíjejí terapeutické účinky, má také dopad na redoxní stav buněk. Proto detekcí intenzity fluorescence dihydroethyleniaminu lze vyhodnotit dopad léků na buněčný redoxní stav a potenciální terapeutická léčiva lze prověřit. Kromě toho lze také použít dihydroethylendiamin ke studiu mechanismu interakce mezi léky a nádorovými buňkami, což poskytuje silnou podporu pro vývoj léčiva a klinické použití.
5. Hodnocení biologické bezpečnosti
Dihydroethylen lze také použít v oblasti hodnocení biologické bezpečnosti. Pod vlivem znečišťujících látek a toxinů na životní prostředí se může redoxní stav buněk změnit. Detekcí intenzity fluorescence dihydroethylendiaminu lze vyhodnotit dopad těchto látek na buněčný redoxní stav, čímž se posoudí jejich biologickou bezpečnost. Tato metoda má velký význam pro hodnocení potenciálních rizik znečišťujících látek na životní prostředí a zajištění lidského zdraví.
Podrobné kroky a odpovídající chemické rovnice pro syntézudihydroethididiumV laboratoři je proces zahrnující organickou chemickou syntézu.
1. Příprava surovin
Výchozí materiály: Vyberte vhodný výchozí materiál, který může být sloučenina obsahující benzenový kroužek a amino skupinu.
Rozpouštědla a katalyzátory: Vyberte vhodná rozpouštědla (jako je ethanol, methanol atd.) A katalyzátory (jako jsou katalyzátory přechodných kovů) na základě typu reakce.
2. Reakce prvního kroku: Úvod a úprava benzenového prstence
Typ reakce: Substituční reakce nebo vazba reakce aromatických uhlovodíků.
Specifické kroky: Pod působením katalyzátoru je výchozí materiál reagován s vhodným benzenovým kroužkem zavádějícím činidla (jako je kyselina fenylboronová, halogenovaný benzen atd.) Zavedení struktury benzenu.
Chemická rovnice: Vzhledem k neznámé struktuře specifických reaktantů a produktů se zde používá obecný vzorec:
Počáteční materiál+Benzenový prsten Úvod Reagent → Intermediate Product 1
3. Reakce druhého kroku: Úvod nebo úprava aminových skupin
Typ reakce: Aminační reakce nebo substituční reakce aminu.
Specifické kroky: Za vhodných podmínek reagujte meziprodukt 1 s aminačními činidly (jako jsou aminy, azidy atd.) Chcete -li zavést nebo modifikovat amino skupiny.
Chemická rovnice:
Intermediate Product 1+ Aminační činidlo → Intermediate Product 2
4. Reakce třetího kroku: Hydrogenační reakce
Typ reakce: Hydrogenační reakce.
Specifické kroky: Pod působením katalyzátorů (jako je platina, palladium atd.) A vodíkového plynu je meziprodukt 2 hydrogenován za účelem získání dihydroethylenového ingotu nebo jeho analogů.
Chemická rovnice:
Intermediate Product 2+ H2 → Dihydroethylen Ingot (nebo podobný)
5. Čištění a charakterizace
Čištění: Purifikujte produkt pomocí metod, jako je rekrystalizace a chromatografie sloupce.
Charakterizace: Použijte techniky, jako je hmotnostní spektrometrie, infračervená spektroskopie a jaderná magnetická rezonance pro charakterizaci produktu a potvrzení jeho struktury a čistoty.
Dihydroethididium(DHE) je fluorescenční sonda široce používanou v biologickém výzkumu. Jeho jedinečné vlastnosti fluorescence mu poskytují významné výhody při detekci intracelulárních reaktivních druhů kyslíku (zejména superoxidových aniontů). Následuje podrobný úvod do vlastností fluorescence ethylenových dihydrogenů:
Samotný dihydroethylen je ne fluorescenční sloučenina, ale když vstupuje do buněk, může být oxidován intracelulárními superoxidovými anionty (o ₂ ⁻), čímž se převádí na ethylen. Ethylenglykol je fluorescenční sloučenina, která se může vázat na DNA a RNA. Proto, když je dihydroethylen -glykol oxidován na ethylenglykol, bude se vázat na nukleové kyseliny v buňkách a emituje silnou červenou fluorescenci.
Před a po oxidaci dochází k významné změně fluorescenčních spektrálních charakteristik dihydroethylgotů. Pokud není oxidován, samotný dihydroethyl ingot nevyvolává fluorescenci. Když je oxidován na ethylenový oxid, jeho maximální vlnová délka excitace je obvykle kolem 488nm nebo 530 nm a její maximální emisní vlnová délka je kolem 610 nm. Díky tomu je kompatibilní s filtračními systémy běžných fluorescenčních mikroskopů nebo průtokových cytometrů, což usnadňuje zobrazování fluorescence a kvantitativní analýzu.
Intenzita fluorescence dihydroethylsulfátu je pozitivně korelována s hladinou intracelulárních superoxidových aniontů. Když se koncentrace intracelulárních superoxidových aniontů zvyšuje, více dihydroethylenediaminu se oxiduje na ethylendiamin, který se váže na nukleové kyseliny a emituje silnější fluorescenční signály. Proto detekcí intenzity fluorescence dihydroethylenemianu lze hladinu intracelulárních superoxidových aniontů nepřímo odrážet.
Fluorescenční komplex vytvořený kombinací dihydroethyleetlylenglykolu a nukleové kyseliny má vysokou stabilitu a není snadno bělený ani enzymaticky hydrolyzován. To má za následek dobrou fluorescenční stabilitu dihydroethylengylenglykolu při dlouhodobých experimentech pro zobrazování nebo kontinuální monitorování, což je prospěšné pro přesné hodnocení dynamických změn intracelulárních superoxidových aniontů.
Využitím fluorescenčních vlastností ethylendiaminu mohou vědci používat zobrazovací techniky, jako je fluorescenční mikroskopie nebo průtoková cytometrie ke sledování a analýze hladin intracelulárních superoxidových aniontů v reálném čase. Tato metoda má výhody vysoké citlivosti, specificity a vysoce výkonné a poskytuje výkonný nástroj pro odhalení mechanismů reaktivních druhů kyslíku v buněčné fyziologii a patologii.
Dihydroethidium (Dihydroethidium, DHE) je skutečně modrá fluorescenční sonda propustná buňka, která se v buňkách používá hlavně k detekci superoxidového radikálního aniontu (o {1}}). Následuje princip jeho detekce a jeho aplikačních případů v biologickém výzkumu:
Princip detekce
DHE může být dehydrogenován intracelulárním superoxidovým anionem za vzniku ethidia (např. Ethidium Bromid) po požití živými buňkami. Ethidium se může vázat na RNA nebo DNA za vzniku červené fluorescence. Když je hladina iontového aniontu intracelulárního superoxidu vyšší, produkuje se více ethidium a červená fluorescence je silnější; Naopak je slabší. To umožňuje detekci hladin superoxidů aniontových hladin s DHE. Současně samotný DHE fluoresuje modrou v cytoplazmě, dokud není oxidován, a poté bude vložen do buněčné DNA, čímž se jádro zbarví jasně fluorescenční červenou.
Příklady aplikace
Detekce produkce ROS v jaterní tkáni: Řezy jaterní tkáně jsou připraveny a inkubovány s DHE. Řezy jsou poté pozorovány pomocí fluorescenčního mikroskopu a procento DHE-pozitivních buněk se vypočítá kvantitativní morfometrickou analýzou k posouzení produkce ROS (reaktivní druhy kyslíku).
Pro prozkoumání změn v antioxidačních enzymech a glutathionu redoxního stavu CD 34+ buněk v hypoxických a normoxických stavech: V této studii byl superoxid O 2- označen pomocí DHE a poté testován up-flow. Výsledky ukázaly, že obsah kyslíku měl vliv na generování superoxidu a peroxidu, s vyšší rychlostí tvorby peroxidu v normoxickém stavu.
Výše uvedené principy a případy aplikací ukazují, že DHE, jako superoxidová aniontová fluorescenční sonda, má v oblasti biologického výzkumu širokou škálu aplikací. Lze jej použít nejen k posouzení úrovně oxidačního stresu v buňkách, ale také poskytnout důležitý základ pro mechanismus onemocnění a rozvoj antioxidačních léčiv.
Populární Tagy: dihydroethidium cas 104821-25-2, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, nákup, cenu, hromadný, na prodej