Liraglutide Powder CAS 204656-20-2

Liraglutidový prášek, molekulární vzorec C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, molekulová hmotnost 1209,40. Je to uměle syntetizovaný acylovaný lidský glukagon, jako je analog peptid-1 (GLP-1) s více než 97% sekvenční podobností ve srovnání s přirozeným GLP-1. Lze rozpustit ve vodě, ethanolu a propylenglykolu. 34. poloha lysinu přirozené molekuly GLP-1 je nahrazena argininem, který nejen zachovává a prodlužuje dobu vazby mezi acylačními produkty a proteiny, ale také významně překonává nevýhodu snadné degradace GLP. Za normálních podmínek skladování vykazuje dobrou stabilitu a jeho vodný roztok může udržovat fyzikální a chemickou stabilitu po dobu nejméně 2 let.

Genetická toxicita: Výsledky testu Ames proLiraglutidový prášek, chromozomální aberační test na lymfocyty lidské periferní krve a test mikronukleusů potkanů ​​byl negativní.

Reprodukční toxicita:

1. Samci potkanů ​​byly subkutánně injikovány 0,1, 0,25 a 1,0 mg/kg/d liraglutidu 4 týdny před pářením a během páření. Při dávce 1,0 mg/kg/d nebyla plodnost mužského zvířete přímo ovlivněna. Podle výpočtů AUC v plazmě byla systémová expozice generovaná touto dávkou přibližně 11krát vyšší než expozice člověka při maximální doporučené lidské dávce (MRHD). Subkutánní injekce 1,0 mg/kg na samice potkanů ​​vedla ke zvýšení včasné embryonální smrti, viditelnému přírůstku hmotnosti a snížení příjmu potravy.

2. Od 2 týdnů před pářením do 17. dne těhotenství u ženských potkanů ​​byly podány subkutánní injekce 0,1, 0,25 a 1,0 mg/kg/d liraglutidu. Podle výpočtů AUC v plazmě byla systémová expozice generovaná těmito třemi dávkami přibližně 0,8, 3 a 11krát vyšší expozice pod MRHD. Ve skupině s dávkou 1 mg/kg/d došlo k mírnému nárůstu počtu časných embryonálních úmrtí. Byly pozorovány při všech dávkách fetálních abnormalit, renálních a vaskulárních variací, nepravidelné osifikace lebky a úplný stav nadměrné osifikace. Při dávce 1,0 mg/kg/d byly pozorovány skvrnité jater a mírné kroucení žebra. Výskyt malformací fetálních přesahujících stejné období a historickou kontrolu je: orofaryngeální malformace a/nebo stenóza při otevření krku v dávce 01 mg/kg/d a pupeční defekty v dávkách 0,1 a 0,25 mg/kg/d.

6. až 18. den těhotenství byli králíci subkutánně injikováni liraglutidem při koncentracích 0,01, 0,025 a 0,05 mg/kg/d. Podle výpočtů AUC v plazmě byla systémová expozice těhotných králíků nižší než expozice lidí během MRHD. Ve všech dávkách se hmotnost plodu snížila a celkový výskyt závažných plodových abnormalit se zvýšil způsobem závislým na dávce. V dávkách 0,01 mg/kg/d (ledviny, ramenní a slezinové kosti), větší nebo rovna 0,01 mg/kg/d (oči a přední strany), 0,025 mg/kg/d (mozek, ocas a obratle, velké krevní cévy a srdce), větší než 0,025 mg/kg/d (STREBUM), AS, Asi, a Asi, Asi, a rovné nebo rovné nebo rovné nebo rovné) a rovné nebo rovné nebo rovné 0,05 mg/kg/d (parietální kosti a velké krevní cévy), výskyt malformací překročil výskyt současných a historických kontrol. Nepravidelné osifikace a/nebo kosterní abnormality se nacházejí v lebce a límci, obratlech a žebrech, sternum, pánvi, coccyxu a kostech ramen a sleziny; K dispozici je také mírná viditelná kosterní variace závislá na dávce. Viscerální abnormality se nacházejí v krevních cévách, plicích, játrech a jícnu. Všechny léčebné skupiny vykazovaly dvojité laloky nebo bifurkace žlučníku, ale v kontrolní skupině nebyla pozorována žádná podobná situace.

4. Během období od 6. dne těhotenství po odstavení nebo ukončení laktace ve 24. den byly samice potkanů ​​subkutánně injikovány 0,1, 0,25 a 1,0 mg/kg/d liraglutidu. Podle výpočtů AUC v plazmě byla systémová expozice přibližně 0,8, 3 a 11krát vyšší než expozice člověka během MRHD. Dodací doba doručení většiny zvířat ve skupině léčené byla mírně zpožděna. Průměrná hmotnost novorozenců v léčebné skupině byla nižší než v kontrolní skupině. Samice potkanů ​​ve skupině s dávkou 1,0 mg/kg/d vykazovaly během porodu ztrátu krve a vzrušení. Průměrná tělesná hmotnost potkanů ​​F2 potomků v léčebné skupině od narození do 14. dne po narození byla nižší než u kontrolní skupiny, ale rozdíly mezi skupinami nedosáhly statistické významnosti.

Liraglutidový prášekje uměle syntetizovaný acylovaný lidský glukagon, jako je analog peptid-1 (GLP-1) s více než 97% sekvenční podobností ve srovnání s přirozeným GLP-1. Molekulární struktura liraglutidu zahrnuje následující hlavní vlastnosti: 34. poloha lysinu přirozené molekuly GLP-1 je nahrazena argininem, který nejen zachovává a prodlužuje dobu vazebné mezi acylačními produkty a proteiny, ale také významně překonává znevýhodnění snadné degradace GLP; K 26. lysinu byl přidán další postranní řetězec mastných kyselin, což pomáhá prodloužit poločas acylačních produktů in vivo. Tyto jedinečné molekulární změny způsobily, že delilaglutid vykazoval vynikající účinky v klinické léčbě, zejména u diabetu a úbytku hmotnosti.

Chemické metody pro syntetizaci liraglutidu zahrnují hlavně následující kroky:

1. Syntéza fragmentu

Za prvé, rozdělte celý liraglutid do několika segmentů, které lze obecně rozdělit do pěti segmentů: 1. až 4. aminokyseliny, 5. až 10. aminokyseliny, 11. až 16. aminokyseliny, 17. až 24. aminokyseliny a 25. až 31. aminokyseliny. Každý fragment je syntetizován samostatně, což může snížit obtíže a náklady na syntézu peptidů a zlepšit účinnost syntézy.

Pro syntézu každého fragmentu se obecně používá syntéza syntézy pevné fáze nebo metody syntézy kapalné fáze. Metoda syntézy v pevné fázi zahrnuje spojování karboxylových skupin aminokyselin k pryskyřici, poté postupně přidává aminokyseliny do pryskyřice postupně a nakonec odříznutí peptidů z pryskyřice. Metoda syntézy kapalné fáze zahrnuje rozpuštění všech aminokyselin v organickém rozpouštědle a poté je v sekvenci kondenzuje za vzniku peptidových fragmentů.

2. spojovací reakce

Proveďte spojovací reakci na 5 peptidových fragmentech syntetizovaných v kroku 1 a vytvořte úplný liraglutid. Spojovací reakce může být prováděna pomocí chemických nebo biologických vazebných látek a specifickou metodu lze vybrat podle skutečných potřeb.

Při vazební reakci je nutné spojit aminovou skupinu každého fragmentu s karboxylovou skupinou dalšího fragmentu. K dosažení tohoto cíle je obvykle nutné používat kondenzační látky, jako je DIC nebo BOP. Tato kondenzační činidla mohou podpořit reakci mezi amino a karboxylovými skupinami a vytvářet peptidové vazby. Při vazební reakci by měla být také věnována pozornost kontrole reakčních podmínek, jako je teplota, hodnota pH a reakční doba, aby se zajistil hladký pokrok reakce.

3. čištění a identifikace

Syntetizovaný liraglutid musí být vyčištěn a identifikován, aby se zajistila čistota a kvalitu produktu. Čištění se obvykle provádí pomocí metod, jako je vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC) nebo elektroforéza, následuje identifikace pomocí hmotnostní spektrometrie, jaderné magnetické rezonance a další metody. Těmito prostředky lze zajistit, že molekulová hmotnost a sekvence syntetizovaného produktu jsou konzistentní s očekáváními a neexistují žádné nečistoty ani zbytky vedlejšího produktu.

4. Další úpravy

Kromě výše uvedených kroků jsou někdy vyžadovány jiné úpravy, jako je přidání nebo odstranění ochranných skupin. Tyto kroky jsou také nezbytné, protože mohou chránit aktivní skupiny v peptidech před zničením nebo dochází k vedlejším reakcím, což zlepšuje kvalitu a výnos syntetizovanéhoLiraglutidový prášek.

Výše uvedené jsou hlavní chemické metody pro syntetizaci liraglutidu, ale při praktickém provozu je třeba samozřejmě zaznamenat některé detaily a techniky. Například výběr vhodného systému rozpouštědla, kontrolu teploty a pH a použití vhodných katalyzátorů může ovlivnit účinnost syntézy a kvalitu produktu. Proto je třeba při praktickém provozu provést úpravy a optimalizace podle konkrétních okolností.

Liraglutid (dlouhodobě působící agonista receptoru GLP-1) hraje významnou roli při léčbě diabetu. Pro zajištění kontroly kvality je nutné stanovit vědecké a přísné analytické metody a provádět systematickou validaci, aby byla zajištěna spolehlivost těchto metod. Následující analýza se provádí ze tří aspektů: ověřovací položky, metody ověření a klíčové kontrolní body.

Základní ověřovací položky a technické požadavky

Specifičnost

Cíl: Prokázat, že metoda může odlišit liraglutid od nečistot, degradačních produktů a pomocných látek.

Strategie implementace:

Chromatografie: Použijte HPLC-UV nebo UPLC-MS. Prostřednictvím testů nucené degradace (jako je vysoká teplota, expozice světla, hydrolýza na bázi kyseliny), generují degradační produkty a ověřují stupeň separace hlavního vrcholu a vrchol nečistoty (větší nebo rovna 1,5). Například ve studii modelu myši ApoE-/- po oxidovaném liraglutidu je třeba chromatografické analýzy potvrdit degradační produkty (jako jsou adukty kyseliny mravenčí), aby se zajistila separační účinek degradačních produktů od hlavního vrcholu.

Spektroskopie: Pomocí detektoru PDA porovnejte UV spektra hlavního vrcholu a nečistot a potvrďte čistotu píků.

Blank Control: Ověřte nepřítomnost falešně pozitivních signálů pomocí vzorků bez liraglutidu (jako jsou roztoky pomocných látek).

 

Přesnost

Cíl: Aby se zajistilo, že naměřené výsledky jsou blízké skutečné hodnotě a míra obnovy je kontrolována v rámci 98% - 102%.

Strategie implementace:

Zkouška standardního přidání: Přidejte známé množství referenční látky do vzorku se známým obsahem liraglutidu a změřte míru zotavení. Například při analýze formulace přidejte 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml a 1,5 mg/ml liraglutidu k prázdnému roztoku excipientu, opakujte každou koncentraci třikrát a vypočítejte průměrnou rychlost zotavení.

Metoda srovnání: Porovnejte s klasickými metodami (jako je titrace) nebo ověřenými metodami (jako jsou metody farmakopoeia) a odchylka výsledku by měla být menší nebo rovná 2%.

 

Přesnost

Cíl: Vyhodnotit stupeň blízkosti opakovaných výsledků měření, přičemž RSD menší nebo rovna 2%.

Strategie implementace:

Opakovatelnost: Proveďte 6 po sobě jdoucích měření stejného vzorku stejným analytikem, stejným nástrojem a stejnou dávkou vzorků a vypočítejte RSD.

Přesná přesnost: Vypočítejte RSD stanovením stejné dávky vzorků různými analytiky, různými nástroji a různými daty. Například při stanovení obsahu liraglutidu by měla být opakovatelnost RSD menší nebo rovná 1,5%a střední přesnost RSD by měla být menší nebo rovná 2,0%.

Reprodukovatelnost: ověření spolupráce pomocí více laboratoří (jako jsou standardní metody farmakopoeia), RSD by měla dodržovat zásady pokynů.

 

Limit detekce a limit kvantifikace

Cíl: Stanovení minimální koncentrace, kterou metoda může detekovat a kvantifikovat liraglutid.

Strategie implementace:

Metoda poměru signálu k šumu: Určete LOD s poměrem 3: 1 signál-šum a určete LOQ s poměrem 10: 1 signál-šum. Například v metodě HPLC-UV může být LOD liraglutidu až 0,01 ug/ml a LOQ je 0,05 ug/ml.

Metoda standardní křivky: Vypočítejte LOD a LOQ pomocí signálů odezvy standardních látek s nízkou koncentrací (například 0,1 UG/ML - 1 UG/ML).

 

Linearita

Cíl: Prokázat, že signál odezvy je úměrný koncentraci, s R² větší nebo rovna 0,999.

Strategie implementace:

Test koncentrace gradientu: Připravte 5-7 koncentrační gradienty (jako je 0,1 mg/ml - 2.0 mg/ml) standardních roztoků, změřte oblast píku nebo hodnotu odezvy a nakreslete standardní křivku.

Zbytková analýza: Zkontrolujte, zda jsou zbytky náhodně distribuovány a neexistuje žádná systematická odchylka.

 

Rozsah

Cíl: Pro stanovení použitelného rozsahu koncentrace metody obvykle 120% LOQ na horní hranici linearity.

Strategie implementace:

Stanovení obsahu: Rozsah je nastaven na 80% - 120% označené množství. Například rozsah stanovení obsahu formulace liraglutidu by měl být 0,4 mg/ml - 1.2 mg/ml. Kontrola nečistot: Podle pokynu ICH Q3D nastavte mezní rozsah nečistot (např. Jediná nečistota menší nebo rovná 0,5%, celková nečistota menší nebo rovná 2,0%).

Validační dokumenty a správa dat

01

Plán ověření a hlášení

Jasně definujte ověřovací položky, metody, standardy přijetí a abnormální postupy manipulace. Například, pokud přesný RSD překročí limit, je nutné prozkoumat poruchy nástroje nebo provozní chyby.

Zaznamenejte původní data (jako jsou chromatogramy, standardní křivky, tabulky výpočtu obnovy), abyste zajistili sledovatelnost.

02

Vývoj metody indikace stability

Pro povinné testy degradace by měl pokrývat oxidaci, expozici světla, hydrolýzu atd., Aby se simuloval skutečné podmínky skladování. Například liraglutid umístěný při 60 stupních po dobu 48 hodin, rychlost degradace by měla být větší nebo rovná 10%, aby se ověřila schopnost metody detekovat degradační produkty.

03

Dodržování předpisů

Sledujte Ich Q2 (R2), USP<1225>, a čínské pokyny pro GMP, které zajistí, že ověřovací položky pokrývají základní ukazatele, jako je specifičnost a přesnost.

Pro analýzu elementárních nečistot by to mělo dodržovat ICH Q3D a USP<233>Požadavky, kontrolu limitů 1 třídních prvků, jako jsou jako, CD a PB.

Populární Tagy: Liraglutide Powder CAS 204656-20-2, dodavatelé, výrobci, továrna, velkoobchod, nákup, cena, hromadná, na prodej